293T细胞

培养液中含钙、镁离子容易导致细胞抱团，所以洗涤细胞时要注意使用无钙镁平衡盐的溶液。对于贴壁非常牢固的细胞，可以分多批多次消化，这样可以较大程度地降低胰酶对细胞的损伤，保证细胞的良好状态，避免细胞抱团。细胞生长密度过高也容易导致细胞成簇，70%－80％的密度就好，这样可以大大降低细胞抱团的几率。

如果细胞已经长成集落，可先将细胞低密度传代，第二天再消化传代，这样连续传三次，细胞抱团就会越来越小，几次传代后，再按照常规消化方法和时间能将细胞逐渐传成单个的。消化过程中尽量不要使劲摇动细胞，这样细胞特别容易成屑样脱落。细胞一旦脱落入悬液里就很难再将其吹打成单个，所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，严格控制好消化程度。

控制细胞密度不要太高，聚团的话可以用pbs冲洗

293T细胞在培养时容易团在一起并产生飘移现象，这可能与细胞的特性和培养条件有关。下面是一些常见的方法和建议来避免这些问题，并确保转染实验的顺利进行：

1. 细胞密度控制：细胞过于密集可能导致细胞团聚和飘移。在培养293T细胞时，适当控制细胞密度，避免过度密集。定期进行细胞传代以保持适当的细胞密度。

2. 培养基配方：确保使用适合293T细胞的培养基配方，并遵循正确的培养条件。使用含有适当的营养物质和补充物的培养基，以促进细胞的正常生长和附着。

3. 细胞处理和培养技术：在细胞处理和传代过程中，避免过度的机械刮伤或强力摇动，以防止细胞团聚和飘移的发生。使用轻柔的细胞处理方法，如轻轻拍击培养器底部来帮助分散细胞。

4. 适当的培养器具：使用适合的培养器具，如培养皿或培养板，可以提供良好的细胞附着表面，减少细胞团聚和飘移的发生。

5. 转染实验：细胞团聚和飘移可能对转染实验产生一定的影响。在进行转染前，确保细胞处于健康的状态，并尽可能使用单个细胞悬浮状态进行转染，以减少干扰。

可能是细胞传代次数太多，但不影响转染效果。转染前两天铺板，转染时细胞密度60-70%，太低的话加完转染试剂2-3h就会飘。加转染试剂时倾斜培养皿/板，把试剂往培养基那侧慢慢滴加，加完尽快摇匀，摇匀时拿在手上左右前后这样。

这种情况做转染的话肯定有影响的，建议重新复苏细胞