为什么软琼脂克隆形成实验的0.3%上层胶融化了

考虑是上层胶浓度太低了，建议提高上层胶浓度

如果您在软琼脂克隆形成实验中发现上层低熔点琼脂糖胶融化了，可能有几个原因导致这种情况发生：

1. 培养条件：温度可能不够低或不稳定，导致低熔点琼脂糖胶融化。尽管您在4°C冰箱中存放了15分钟，但在实验室环境中的温度可能有所变化，特别是如果实验室温度较高或不稳定，可能会导致低熔点琼脂糖胶融化。

2. pH值：琼脂糖胶的pH值可能会影响其稳定性。确保您在制备琼脂糖胶时使用了正确的缓冲液，并检查培养介质的pH是否合适。

3. 细胞产生热量：细胞代谢产生的热量可能会导致低熔点琼脂糖胶融化。如果您的细胞密度较高或细胞活跃度较高，可能会产生足够的热量使琼脂糖胶融化。

4. 琼脂糖胶浓度：低熔点琼脂糖胶的浓度可能对其稳定性产生影响。如果浓度较低，可能更容易融化。您可以尝试增加低熔点琼脂糖胶的浓度以增加其稳定性。