为什么细胞解冻后，活细胞占比较低?
dxy_kdmw6dtq
5 个回答
huarenqiang5
出现低存活率的可能原因及解决方案如下：
1.解冻过程中细胞裂解
解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够高，考虑到这一损失。起始浓度为106至107细胞/毫升。
2.解冻过程中的问题
解决方案：在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物，保存时间为1-5天，但这不是保存的首选方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养。
3.对冷冻液过敏
解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。
B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的最佳条件在对数期。
4.被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄
解决方案：解冻最近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
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1.细胞降温速度欠佳
2.细胞冻存量过低
3.复苏时处理速度太慢，复苏过程不当
遇到这种情况如何处理呢：
1.严格按照程序降温步骤
2.确保冻存细胞量足够
3.复苏过程要迅速
balalaLy
可能是冻存时没有进行梯度冻存造成大部分细胞死亡，也可能是解冻时时间太久，细胞解冻后在冻存液中时间过长，导致大部分细胞死亡。
天一湖医者
有可能是因为解冻过程中细胞裂解。
loveliufudan
细胞解冻后活细胞占比较低可能有几个原因：
1. 冻存过程中的细胞损伤：细胞在冻存过程中可能受到冷冻保护剂、冷冻速率、冷冻和解冻过程中的温度变化等因素的影响，导致细胞膜的破坏、细胞器的损伤和细胞代谢活性的降低。这些损伤可能会导致细胞解冻后的存活率降低。
2. 冻存期间的细胞老化：细胞在长时间冻存的过程中，可能会发生细胞老化。细胞老化会导致细胞的功能和代谢活性的下降，从而影响细胞解冻后的存活率。
3. 解冻过程中的细胞应激：解冻过程中的温度变化、解冻液的渗透压变化以及解冻速率的不适当等因素可能会对细胞造成应激。这些应激可能导致细胞膜破裂、细胞器功能受损以及细胞凋亡等，从而降低细胞解冻后的存活率。
4. 解冻过程中的细菌或霉菌污染：解冻过程中，细胞培养器具、培养基或试剂可能受到细菌或霉菌的污染。这些微生物的存在会对细胞的存活产生负面影响，导致解冻后的活细胞比例降低。
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