细胞空隙之间有黑色点状物，多次传代之后仍然存在。请问这是什么？该如何去除?

1. 细胞碎片

在细胞培养中不合适操作引起的化学或物理上的刺激，例如胰酶消化时间过长，会导致细胞死亡，从而产生很多碎片。

2. 凋亡小体

在体外培养条件下，细胞很容易受到环境改变的影响，诱发细胞的凋亡，产生凋亡小体。

将细胞用 PBS 洗 2~3 遍，洗的时候，轻轻拍打培养瓶，让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落，再弃去 PBS，消化时先加低浓度的胰酶如 0.05% 胰酶消化 1 min 左右，让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来，去掉低浓度胰酶，然后正常消化细胞，将收集的细胞悬液慢速离心（500~600 rpm/min，5~6 min）并更换新的培养瓶，并可以尝试适当增加血清浓度进行培养。

|细胞培养中出现的小黑点可以分为以下几类：

1. 细胞碎片

在细胞培养中不合适操作引起的化学或物理上的刺激，例如胰酶消化时间过长，会导致细胞死亡，从而产生很多碎片。

2. 凋亡小体

在体外培养条件下，细胞很容易受到环境改变的影响，诱发细胞的凋亡，产生凋亡小体。

3. 血清中的沉淀

经过热处理的血清中，作为常见沉淀物质的磷酸钙会显著增多，且由于布朗运动会看上去可以活动。

4. 支原体污染

由于支原体的污染，导致出现的小黑点，明显影响细胞增长。

如果是不移动黑色点状物考虑是细胞碎片，可以冲洗去除

1、细胞生长过老，破碎的细胞残骸;

2、血清质量不好，反复冻融的成果;

3、制造培育基的pH值偏高，不宜细胞生长;

4、制造培育基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;

可能是细胞状态不好，分泌的物质，也可能是细胞存在支原体污染，如果是支原体污染细胞会出现明显的生长缓慢

黑色点状物在细胞空隙中出现可能有几种可能的原因，其中一种可能性是细胞培养过程中的细胞碎片或细胞残骸。这些碎片可能来自于细胞的自溶、细胞死亡或细胞分裂过程中的断裂。如果这些黑色点状物经过多次传代后仍然存在，可能需要进一步考虑其他因素，例如细胞培养器具的污染或培养基成分的问题。

要去除黑色点状物，可以尝试以下方法：

1. 细胞筛选：使用显微镜或细胞显像系统，仔细检查细胞空隙中的黑色点状物。如果这些点状物确实是细胞碎片或残骸，可以尝试用吸管或细胞刮片等工具进行筛选，将其从细胞空隙中移除。

2. 培养基更换：考虑更换新鲜的培养基，以确保培养基成分的质量和适当性。过期的培养基或因不正确存储而受到污染的培养基可能会导致黑色点状物的形成。

3. 器具消毒和更换：彻底清洁和消毒培养器具，包括培养皿、培养瓶和移液器等。使用新的无菌器具可以排除器具本身的污染问题。

4. 检查细胞状态：除了黑色点状物外，还应仔细观察细胞的形态、生长状态和细胞健康状况。如果细胞出现异常形态、细胞聚集或其他异常迹象，可能需要进一步评估细胞的质量和健康状况。