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sswei
293T细胞很不好养,细胞贴壁性不是很好,且消化的度不是太好掌握,操作时动作一定要轻。如果细胞状态不好的话,考虑添加点NEAA。就是有的时候操作可能动作大了点,细胞就会破碎,293系列的细胞基本上都是这个特性,刚复苏的时候贴壁较慢,可以在培养箱多放一天让它多贴壁。平时培养过程中贴壁较差,拍打或液体冲洗都可以使细胞脱落,所以消化时间很快,胰酶可以适当降低浓度,不要加EDTA了,基本上不要放到37度的,在操作台里面放一会就可以了,最主要的就是在培养过程中千万不要让细胞缺营养,要不然会大面积的漂浮死亡,即使救回来也会影响细胞质量。
huarenqiang5
主要考虑以下几点原因:1.细胞在冻存时的状态不好,活力太低;2.或是传代次数太多,细胞已经老化了;3.孵箱的温度,CO2浓度和孵箱内的去离子水缺失等。
天一湖医者
消化时间没控制好吧,293细胞消化时间不能太久,吹打不能用力,僵化的细胞不死也不生长。
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293系列的细胞基本上都是这个特性,刚复苏的时候贴壁较慢,可以在培养箱多放一天让它多贴壁。平时培养过程中贴壁较差,拍打或液体冲洗都可以使细胞脱落,所以消化时间很快,胰酶可以适当降低浓度,不要加EDTA了,基本上不要放到37度的,在操作台里面放一会就可以了,最主要的就是在培养过程中千万不要让细胞缺营养,要不然会大面积的漂浮死亡,即使救回来也会影响细胞质量,多花点时间就可以帮这株细胞养的很好,总体上我觉得还是很好养,细胞形态很漂亮,拉网状生长。
loveliufudan
293T细胞的生长速度不稳定可能有多种原因,下面列举了一些可能的因素:
1. 细胞密度的管理:细胞密度过高或过低都可能导致生长速度的不稳定性。如果细胞密度太高,细胞之间的竞争可能导致营养物质不足,从而减慢细胞生长。另一方面,细胞密度过低可能导致细胞生长环境不稳定,影响细胞的代谢和增殖。
2. 细胞培养条件的优化:细胞培养条件,如培养基成分、培养温度、培养器具和培养时间等,可能对细胞的生长速度产生影响。不同的细胞株可能对培养条件的要求有所差异,因此,优化培养条件可能有助于提高细胞生长的稳定性。
3. 细胞质量和健康状况:细胞质量和健康状况对生长速度的稳定性至关重要。细胞的健康状况可能受到污染、感染、细胞老化或变异等因素的影响。确保细胞株的纯度和健康状态,定期进行细胞的鉴定和检测,可以减少细胞生长速度不稳定的问题。
4. 细胞的遗传变异:细胞株中的遗传变异可能导致细胞生长速度的不稳定性。长时间的细胞培养和传代过程中,细胞可能发生突变或选择性压力,导致细胞亚群的变异和不稳定性。