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原代细胞的培养条件非常重要,其中培养液的pH值是一个重要的因素。如果培养液的pH值变化太快,可能有以下几种原因:
细胞代谢产物的积累:细胞在培养基中生长繁殖时会产生代谢废物,这些代谢产物会改变培养基的pH值。如果培养基中细胞密度较高,代谢产物积累的速度就会更快,导致pH值的变化更加剧烈。
培养液的缓冲能力不足:缓冲液是调节pH值的重要组成部分,如果培养液中缓冲能力不足,就会导致pH值的变化过快。
气体平衡的问题:细胞培养需要氧气供应,并产生二氧化碳,因此需要一个气体平衡系统。如果气体平衡系统不完善,细胞产生的二氧化碳不能及时排出,就会导致pH值下降。
细胞培养条件的变化:有时候,细胞培养条件的变化,比如温度、CO2浓度等,也可能导致pH值的变化。
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可能是细胞密度太大的原因,降低细胞密度再培养。
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通常细胞生长得非常快时,pH值通常下降得很快。此时可以及时传代、提高传代比例或降低血清量等方法进行解决。此外,培养瓶盖拧得太紧、NaHCO3 缓冲系统缓冲能力不够、培养液中盐浓度不正确、细菌、酵母或真菌污染等也能导致pH值通常下降得很快。
随着培养基开盖时间的增长,pH值会不断升高; 培养基中CO2挥发,导致溶液碱性升高。此外培养基存储条件不合适; 操作时间过长。也会导致溶液碱性升高。