人脐静脉内皮细胞（HUVEC）传代培养，胰酶消化后，在培养基中，放入培养箱前在显微镜下观察，细胞会聚团是怎么回事啊？菜鸡求助大

1.细胞-细胞相互作用：HUVEC有一定的自组织能力，胰酶消化后可能会导致表面受损或暴露出附着分子，促进细胞聚集和形成群体。

2.细胞-基质相互作用：HUVEC也可以通过与培养基中存在的基质分子（如纤维蛋白、胶原等）相互作用，构建三维结构并形成群体。

3.胰酶活性未被及时抑制：在胰酶消化过程中，如果胰酶活性未被及时抑制，则会导致胰酶继续消化HUVEC表面的附着分子，使得细胞表面失去黏附能力，从而发生细胞聚集。

可能是由于以下原因之一：

细胞密度过高：如果细胞密度过高，细胞可能会互相接触并形成聚集，特别是在初始阶段的细胞粘附期间。如果这是问题所在，你可以尝试减少细胞数量并添加更多的培养基。

细胞附着不良：如果细胞无法附着在培养皿的表面上，它们可能会互相聚集形成团块。你可以尝试使用不同的培养皿或调整培养基成分以促进细胞附着。

培养皿表面不平坦：如果培养皿表面不平坦，细胞可能会在一些凸起区域上聚集，形成团块。你可以尝试使用表面更加平坦的培养皿。

培养条件不当：如果培养条件不适当，例如培养箱的温度、湿度、气体组成等，也可能会导致细胞聚集成团。确保你的培养条件符合HUVEC的生长要求。

如果你已经排除了以上问题，仍然出现细胞聚集成团，你可以考虑将细胞披萨化或进行机械剪切以分散聚集的细胞团块。同时，建议你在细胞培养的过程中进行细菌和真菌的无菌检测，以确保细胞培养的质量。

考虑是细胞消化不足导致的聚团，可以用pbs吹打，或增加消化时间。

细胞消化后可能成片脱落，需要轻柔吹打混匀成单细胞，另外可以进行离心，重悬后效果更好。