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786-0细胞长满后,常规用0.5ml胰酶消化2分钟处理,细胞脱落1000转离心3分钟,1:3比例传代,为啥传代24h后出现大量细胞漂浮的现象,请问各位大佬什么原因,如何去解决呢?
土井挞克树
胰酶的浓度是多少,大量漂浮考虑消化过度,需要降低胰酶的浓度。
loveliufudan
可能有以下几种原因:
细胞密度过高:传代时若细胞密度太高,会导致细胞之间的黏附力降低,容易发生脱落和漂浮现象。可以尝试减少接种数量或者延长细胞的生长时间。
胰酶消化过度:胰酶过度消化细胞,可以导致细胞表面的黏附分子受损,降低细胞的黏附性,从而导致细胞漂浮。可以尝试减少胰酶的浓度和消化时间,或者尝试其他消化酶。
细胞培养条件不适宜:例如培养基pH值不合适、培养温度过高或过低、CO2浓度不足等,都可能影响细胞的生长和附着能力,导致细胞漂浮。可以检查和调整培养条件。
解决方法:
调整细胞密度和接种数量,使其处于合适的生长状态。
调整胰酶的消化时间和浓度,或者尝试其他消化酶。
检查和调整培养条件,确保其适宜细胞的生长。
可以尝试使用细胞黏附剂或涂层,增强细胞的附着能力。
z流沙z
有可能是细胞消化时间过长导致细胞损伤,注意控制消化时间
sswei
漂着的细胞可能是还没贴壁的活细胞,也可能是死细胞。
可以再培养一段时间看看是否贴壁细胞数有所增加或者往培养基中多加一些血清来促进贴壁。
可能由消化过度引起。如果一段时间后还是没贴壁,那说明细胞生活状态比较不好或者细胞死亡了。这可能是由于细菌污染引起的,由镜检观察视野中是否有杂菌判断。如果不是很珍贵的细胞,就重新复苏一管吧。