transwell细胞侵袭

常用冰的4%多聚甲醛，pbs洗的时候轻柔一点

适当降低甲醇的浓度和作用时间。

甲醇固定是常用的细胞固定方法之一，但是甲醇的使用需要注意以下几点：

甲醇需要使用冰冻的，预先冷却的。这是因为甲醇易于蒸发，蒸发时会吸收周围的热量，导致温度降低，使细胞膜破裂，细胞脱落。

固定时间不要过长，20分钟已经足够。

固定前应用PBS进行洗涤，去除培养液中的蛋白质和细胞因子等，避免对细胞造成伤害。

固定后可以用PBS再次洗涤，以彻底去除甲醇。

其他可选的固定剂包括4%的多聚甲醛，PFA等。

在使用甲醇固定的时候，建议将甲醇放在一个干燥的容器中，以避免甲醇吸收空气中的水分而降低其浓度，这也可以减少细胞脱落的可能性。

最后，如果您的细胞在使用甲醇固定后仍然出现脱落，可以尝试使用其他固定剂，如多聚甲醛或PFA，或调整固定时间、温度等参数，以优化固定条件。

一般用甲醇和多聚甲醛固定都可以