Thp1细胞培养的要点

使用半换液的方法进行传代,1周-2周离心一次细胞,细胞可维持较好的增殖。

THP1主要是要注意控制密度，太高或者太稀都不行，传代两三次之后再离心就可以

THP-1细胞培养于含有10%FBS+1%P/S的RPMI-1640培养基中，培养环境为37℃，5%CO2。可以每隔3-4天加一些新鲜的培养基，或直接传代。细胞传代：当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时，即可进行传代。由于是悬浮细胞，可直接将细胞吸出，离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。

注意事项

细胞养不好，可能的原因有，THP-1细胞特别依赖细胞浓度，ATCC上10 5到106每ML，是一个很高的密度，细胞少了就不太容易养好。

细胞株的来源很重要，如直接来源于ATCC（American Type Culture Collection 美国模式菌种保藏中心）生命力要强于国内细胞库的。

注意细胞的密度一定要高，介于5×105—— 106/ML之间，增值的快。细胞数量太少，不适合THP-1生长，一般状态不好的THP-1在培养了3天后数量仍然不多，继续培养一天或者两天，培养基 严重泛黄，细胞数会增加。这一点不同于同是单核细胞系的U937细胞。

THP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长，对培养基变化非常敏感，所以 尽量使用相同Ph的1640。

传代后切忌常移出培养箱观察，否则会影响细胞生长，状态变差，一般首先表现为细胞内颗粒变多。一般THP-1 生长相当快，对于状态已经不好的情况，建议传代后3～4天再观察，一般4天时间培养基已明显泛黄，细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件，你不要老是换培养基。越酸的条件，细胞密度越大，细胞就长得越好;2）不要频繁换液，一般2-3次换液离心一次（只是补充培养基）3） 使用1640（ATCC推荐），注意加碳酸氢钠2.5g就可以了，宁酸勿碱; 4）注意冻存的时候密度大些，推荐用血清冻存。

复苏比较慢，建议开始用小瓶，不要用一次性的。

对于THP-1细胞的离心换液时间，一般来说可以根据细胞密度和培养液的消耗情况来决定。一般来说，当细胞密度达到10^6 -10^7个/毫升时，建议进行离心换液，每次更换的液体量可以根据实验需求来确定。

关于THP-1细胞的传代方法，常用的方法包括化学法、电转染法、和细胞悬液分裂法等。其中，化学法和电转染法的传代效率较高，但可能会对细胞造成不同程度的伤害，而悬液分裂法相对较为温和，可以获得更健康的细胞。具体选择哪种传代方法，可以根据实验需要和细胞状态进行综合考虑。

此外，对于THP-1细胞的培养技巧，以下几点需要注意：

培养液选择：THP-1细胞可以在RPMI-1640培养液中生长，一般需要加入10%的胎牛血清（FBS）。此外，可以添加一些生长因子、抗生素和抗真菌剂来增强细胞生长和防止污染。

CO2浓度：THP-1细胞的最适生长CO2浓度为5%，因此需要在含5% CO2的培养箱中进行培养。

细胞密度：THP-1细胞的最适密度为1-2×10^6个/ml。如果细胞密度过高或过低，都可能影响细胞的生长和传代。

细胞状态检测：THP-1细胞的分化状态会影响其生长和传代，因此在进行实验前需要检查细胞的分化状态，并根据需要添加分化诱导剂。

总之，对于THP-1细胞的培养和传代，需要根据实验需要和细胞状态进行综合考虑，合理调整培养条件和传代方法，以获得最佳的实验效果。

培养基稍微变黄的时候补液或换液即可