细胞提蛋白没有细胞刮用胰酶行不行

T25培养瓶加200-400ul裂解液，一般

加200ul合适。

不建议离心太多次，离心次数太多的话细胞会损伤甚至死亡。

细胞的重心比培养液低，因此在离心时应尽量避免将细胞沉淀干燥。如果您需要对细胞进行多次离心，可以适当缩短离心时间，减少离心速度和加速度，以保持细胞的完整性和生活能力。

Solarbio RIPA裂解液已经含有PMSF，可以有效抑制蛋白酶的活性。如果您需要保护磷酸酶，可以考虑添加磷酸酶抑制剂，如NaF、Na3VO4等。

超声是一种有效的细胞破碎方法，可以更彻底地破碎细胞壁和膜，但也可能对一些蛋白质产生不良影响。如果您的目的是简单地破碎细胞，并且已经使用了足够的裂解液，可以不用超声。

T25培养瓶中的细胞数量大约在1-2×10^6个左右，具体加入多少裂解液需要根据您所需的蛋白质浓度和检测方法来确定。一般来说，可以加入细胞体积的10-20倍裂解液，然后用离心将细胞碎片分离。如果您需要进行蛋白质定量或纯化，请根据实验需求调整细胞数和裂解液的用量。