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MA104培养

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Jlining

有人在养这个细胞吗,MEM+10FBS培养的细胞有很多空泡,传代时胰酶消化时开始拉丝,细胞变得皱皱巴巴(图3是消化2min),细胞开始掉了之后变脏像是什么分泌物,传代后长的很快2days长满。状态很差,细胞不饱满。对病毒也很敏感

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4 个回答

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z流沙z

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一般来说,细胞出现空泡,代表细胞衰老或者状态不佳,很有可能是因为胰酶消化过久。其实从图一看细胞状态还可以,注意控制一下胰酶消化时间,消化时间大概为拍拍培养皿侧壁细胞可以脱落即可,要控制消化密度,不宜每天或者隔天消化,可以传少一点或者将多余的细胞弃掉。另外,消化铺板数小时后即可观察一下细胞,此时细胞差不多贴壁了,如果有较多细胞碎片等,可以用pbs洗两遍,重新添加培养基。

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loveliufudan

有帮助

MA104细胞是一种非常敏感的绿猴肾细胞系,通常用于研究病毒感染和繁殖等方面。以下是一些可能有助于解决您所描述问题的建议:

培养基配方:尝试使用其他培养基,例如DMEM/F12、DMEM等,同时添加10% FBS、1% 青霉素/链霉素和1% 胰岛素/转铁蛋白/硒等添加剂。

消化方法:尝试不同的胰酶浓度和消化时间,消化液的 pH 值为 7.4-7.6。尽可能避免过度消化和过长的消化时间。一般来说,消化时间不应超过5分钟。

培养条件:细胞培养条件应控制在37℃、5% CO2和高湿度下(95%)。同时,每两至三天更换一次完整的培养基。

细胞密度:传代时应根据细胞密度控制传代倍增次数,以避免细胞过度分裂和细胞死亡。建议细胞密度控制在 80% 以下时进行传代。

检查细胞是否受到细菌或真菌感染:通过细菌或真菌感染检测来确认细胞是否受到感染。若发现细胞感染,则需要重新培养。

检查细胞的鉴定和纯度:进行细胞的鉴定和纯度检测,以确认细胞的身份和纯度,避免混合污染的情况出现。

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土井挞克树

有帮助

消化后有很多空泡,这一步细胞状态就不好了,可能是消化时间太长

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sswei

有帮助

在培养细胞过程中出现了空泡,也有可能是细胞凋亡或是营养不够等原因,针对不同的情况需要采用不同的解决办法。在实验中,可以通过时刻关注细胞的状态,及时换液,采用优质血清,保证细胞所需营养充足等,避免空泡的出现。

导致细胞质空泡的原因众多:细胞自噬、细胞老化、细胞污染、渗透压和pH等。

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