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求助!!!请问各位大神多发性骨髓瘤细胞都是怎么养的!!

相关实验:骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则和鉴定

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阿辛加油鸭

从两个星期前拿到MM1S和8226细胞株就开始养,用了15%的血清,状态越来越差,请各位大神指导指导,传授一下经验

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3 个回答

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龙大人驾到

有帮助

多发性骨髓瘤细胞培养需要选择合适的培养基,如人多发性骨髓瘤细胞专用培养基。一般来说,15%的血清对于多发性骨髓瘤细胞的生长可能不够,建议使用20%的血清。MM1S和8226细胞株都是悬浮生长的细胞,传代时需要注意细胞密度和离心条件。

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sswei

有帮助

该细胞同时存在悬浮生长和轻微的贴壁状态。该细胞复苏后需培养2周左右时间,才能恢复正常生长状态。细胞密度不可过高,在细胞汇合前进行传代,过度融合生长细胞容易产生死细胞团该细胞是一种混合生长的细胞;细胞既可以以轻度附着的单层形式生长,也可以以悬浮液形式生长。可以通过添加新鲜培养基来维持培养。或者,可以通过将贴壁细胞用细胞刮铲刮入含有漂浮细胞的培养基中,通过离心收集细胞,将细胞沉淀重悬于新鲜培养基中并分配到新的培养瓶中来对细胞进行传代。建议第一次传代密度为1:2进行。后续的传代可根据实际情况按1:2~1:4的比例进行。

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loveliufudan

有帮助

对于多发性骨髓瘤细胞株的培养,以下是一些常见的注意事项和经验分享:

培养基和培养条件:多发性骨髓瘤细胞株的培养基可以选择RPMI-1640等含有足够营养物质的培养基。培养条件可以选择37°C、5% CO2的培养箱。

血清的使用:血清对细胞的生长和增殖起着重要作用,但血清含有很多未知因素,不同血清的质量也存在差异。可以尝试使用10% FBS(胎牛血清)来替代15%的血清,看看细胞的状态是否会有所改善。

细胞的密度和培养时间:密度过高或过低都可能影响细胞的生长和状态。建议根据细胞株的生长特性和培养瓶的大小来调整细胞的密度,一般可以维持在70%到80%的密度。另外,建议每两到三天更换一次培养基。

感染和污染的控制:多发性骨髓瘤细胞株容易受到细菌、真菌、病毒等的污染和感染,一旦发现应及时采取措施,如更换培养基、添加抗生素等。

保存和传代:建议将细胞保存在液氮中,以备后续实验使用。传代时应根据细胞的生长情况选择合适的时间点进行传代,不要让细胞过度增殖。

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