原代细胞培养贴壁性差如何改进？

建议延长培养时间和提高细胞密度试试。

大多数原代贴壁细胞贴壁时间是6h到12h，细胞不贴壁有好多种原因的：

1、如果你用玻璃培养瓶培养的话，有可能你的瓶子没处理好；建议你用一次性培养瓶，进口的都可以。

2、一般做原代细胞贴壁培养用胰酶消化，消化的程度要掌握好，如果消化时间不到、分散不均匀不贴壁。一般消化有热消化，就是放在37度里消化，时间比较短不好控制，传代培养常用。还有就是冷消化放在4度里，一般在几个小时以上，胰酶浓度也有要求的，一般都用0.125－0.25％之间。ph在7.6左右。

3、还有就是天然培养基的选择，就是血清种类，血清能够使细胞贴壁，并且提供细胞生长的重要营养成分。

贴壁性差可能与细胞的种类、培养条件以及培养基的配方等因素有关。以下是一些可能改进贴壁性的建议：

培养基的配方：尝试使用更适合特定细胞类型的培养基。不同类型的细胞需要的营养物质和生长因子可能不同，使用适合的培养基可以提高细胞的贴壁性。

细胞密度：如果细胞密度过低，可能会影响细胞的贴壁性。尝试将细胞密度调整到适当的范围内。

培养时间：一些细胞需要更长的时间才能够附着到培养皿上。尝试延长培养时间来促进细胞贴壁。

表面涂层：有些细胞需要一些额外的支持来附着到培养皿上。尝试在培养皿表面涂上一些支持细胞附着的物质，例如聚-L-赖氨酸或明胶等。

细胞形态：细胞形态的变化也可能影响细胞的贴壁性。确保使用健康的细胞，并避免过度处理和过度分散。

培养条件：细胞的贴壁性还可能受到培养条件的影响。例如，温度、CO2浓度、氧气浓度、培养皿涂层等都可能影响细胞的贴壁性。尝试调整这些条件来改善贴壁性。