传代的细胞如何抽提RNA

根据用的试剂盒说明书来抽提RNA，细胞长得密的话6孔板一个孔就够了。

按照你用的提取rna的kit里面的说明书，来确定细胞数量，如果用trizol提的话，一般用6孔板的一个孔就可以

抽提可以尽量浓度大一些，有利于后续实验进行

对于巨噬细胞的RNA提取，以下是一般的实验步骤：

收集巨噬细胞：将培养好的巨噬细胞用PBS洗涤一次，去除PBS后，用三氧化二砷（Trizol）或其它适合的RNA提取试剂进行细胞裂解。注意在细胞收集过程中尽可能快地进行，以免RNA降解。

裂解：将细胞与适当的裂解缓冲液混合，将混合物在室温下混合反应5-10分钟，然后将混合物转移到离心管中离心去除残留细胞。

分离：将上清液转移到新离心管中，与同等体积的异丙醇混合，摇晃或轻轻翻转离心管混合后离心沉淀。

洗涤：将沉淀用75%乙醇洗涤一次，去除沉淀后，使用RNase-free水溶解RNA。

关于细胞浓度，RNA的质量和纯度与样品中的RNA量有关。通常需要对足够的细胞进行RNA提取，以获取足够的RNA量。细胞浓度应在1 x 10^6到5 x 10^6/mL之间，以确保足够的RNA产量，并尽量避免RNA分解。在逆转录过程中，可以使用同等量的RNA来合成cDNA，或者根据实验需要进行适当调整。

吸取培养液后用冰的pbs洗两遍，直接加入裂解液