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【求助】细胞培养提RNA

丁香园论坛

7425
求助!!!
细胞转到6孔板培养后长得一直很慢,
目前贴壁50%左右,
能提RNA不?
是不是一定要等到长到80%才能提啊?

有没有什么具体的操作办法让细胞在胰酶消化时损失小一点?

请各位大侠指导,
感激不尽!
1,六孔板的细胞长到50%会有点少,不过如果很着急也是可以提取的

2,楼主可以用PBS洗掉培养基后,不用胰酶消化,直接在六孔板中加入trizol裂解~
selleckchem01 wrote:
1,六孔板的细胞长到50%会有点少,不过如果很着急也是可以提取的

2,楼主可以用PBS洗掉培养基后,不用胰酶消化,直接在六孔板中加入trizol裂解~

正解。
六孔板里的细胞提RNA,我们一直都是用PBS洗洗后直接加TRIZOL
,裂解几分钟后收集到管子里继续抽提。
zitong1983 wrote:
正解。
六孔板里的细胞提RNA,我们一直都是用PBS洗洗后直接加TRIZOL
,裂解几分钟后收集到管子里继续抽提。
我的是贴壁细胞哎,用PBS洗的掉吧?
贴壁的一般洗不掉的
如果是培养瓶呢??
也是直接洗了以后加trizol吗??
大概80%的贴壁细胞加多少trizol??
其实我做培养细胞的RNA提取都不用PBS洗,效果也很好啊。因为怕冰冷的PBS会洗掉细胞。损伤组本身细胞就贴壁不牢靠了。

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