【求助】细胞培养提RNA
丁香园论坛
7280
求助!!!
细胞转到6孔板培养后长得一直很慢,
目前贴壁50%左右,
能提RNA不?
是不是一定要等到长到80%才能提啊?
有没有什么具体的操作办法让细胞在胰酶消化时损失小一点?
请各位大侠指导,
感激不尽!
细胞转到6孔板培养后长得一直很慢,
目前贴壁50%左右,
能提RNA不?
是不是一定要等到长到80%才能提啊?
有没有什么具体的操作办法让细胞在胰酶消化时损失小一点?
请各位大侠指导,
感激不尽!
1,六孔板的细胞长到50%会有点少,不过如果很着急也是可以提取的
2,楼主可以用PBS洗掉培养基后,不用胰酶消化,直接在六孔板中加入trizol裂解~
2,楼主可以用PBS洗掉培养基后,不用胰酶消化,直接在六孔板中加入trizol裂解~
selleckchem01 wrote:
1,六孔板的细胞长到50%会有点少,不过如果很着急也是可以提取的
2,楼主可以用PBS洗掉培养基后,不用胰酶消化,直接在六孔板中加入trizol裂解~
正解。
六孔板里的细胞提RNA,我们一直都是用PBS洗洗后直接加TRIZOL
,裂解几分钟后收集到管子里继续抽提。
zitong1983 wrote:
正解。
六孔板里的细胞提RNA,我们一直都是用PBS洗洗后直接加TRIZOL
,裂解几分钟后收集到管子里继续抽提。
贴壁的一般洗不掉的
如果是培养瓶呢??
也是直接洗了以后加trizol吗??
大概80%的贴壁细胞加多少trizol??
也是直接洗了以后加trizol吗??
大概80%的贴壁细胞加多少trizol??
其实我做培养细胞的RNA提取都不用PBS洗,效果也很好啊。因为怕冰冷的PBS会洗掉细胞。损伤组本身细胞就贴壁不牢靠了。
本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴
师兄微信号:shixiongcoming