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通常是因为:
1.不够混匀:在加入氯仿后,如果您没有充分混合Trizol和氯仿,氯仿和Trizol相互作用的速度会变慢,导致乙醇-RNA混合物不够纯净,最终可能会导致清液沉淀在下层。
2.沉淀时间太短:在加入氯仿后,如果您没有充分静置,氯仿和Trizol的分离可能不充分,也可能导致清液在下层。
3.离心时间不足:如果您没有充分离心,氯仿和Trizol可能没有完全分离,这也可能导致清液在下层。
因此,为了避免这种情况,建议在氯仿加入后充分混合并静置约5-10分钟,然后使用高速离心分离两相,并注意在离心过程中不要摇晃离心管。
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氯仿加多了,建议减少氯仿的使用量
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