奥斯特洛夫斯基旸
最近实验上遇到一个问题:我在肿瘤细胞内沉默某一基因后,对细胞各种表现没什么大的影响,但无意间发现,与对照组相比,同样在无血清培养基下培养48h后,基因沉默组出现明显细胞死亡和形态改变。
这成为了唯一一个显著的细胞表型差异,但我现在不知道接下来该如何研究,血清成分太复杂,无法单一变量,文献搜索也抓不住方向的感觉。
有没有大神能指点一二,给点思路,谢谢谢谢,集思广益,有啥想法都可以,我出现瓶颈了,想不到点了。
dxyc42u
可以考虑下实验组基因沉默时候所加试剂对细胞是否有毒性
毛利小五郎的徒弟
首先你要确定这个结果是真实的还是偶然的,也就是重复性是否良好,建议重复实验后再确定研究思路。
loveliufudan
对于您的问题,我可以给出几点建议:
考虑更换培养基:有可能是血清所含的特定成分对细胞造成影响,因此您可以尝试更换不含血清的培养基,看看是否会产生不同的效果。
检测细胞内生物学变量:可以通过细胞周期分析、细胞凋亡检测(如TUNEL法)、检测细胞内氧化应激情况等方法来评估细胞死亡及其原因。
在不同的条件下培养:您可以尝试在不同的生长条件下培养细胞,比如不同的温度、湿度、氧气浓度等,看看是否有不同的影响。
检测细胞代谢产物:可以通过检测细胞内代谢产物,如检测细胞内抗氧化酶的活性及其他生物学指标,以了解细胞内代谢情况。
这些只是一些潜在的思路,希望对您有所帮助。
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