原理
根据人们的经验，肿瘤细胞在体外不易培养，建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。
当肿瘤组织或细胞初代接种培养后，常出现以下几种情况：
1. 完全无细胞游出或移动；
2. 有细胞移动和游出，但无细胞增殖，细胞长时间处于停滞状态以致难以传代；
3. 有细胞增殖，传若干代后停止生长或衰退死亡；
4. 传数代后细胞增殖缓慢，经过一段停滞期后，才又呈旺盛生长状态，形成稳定生长的肿瘤传代细胞系。
以上现象说明肿瘤细胞对体外生存条件有较高的要求，并需经过对新环境的适应才能生长，因此欲获得好的培养效果，不能局限于一般培养法，必须采用一些特殊的措施。
当肿瘤组织或细胞初代接种培养后，常出现以下几种情况：
1. 完全无细胞游出或移动；
2. 有细胞移动和游出，但无细胞增殖，细胞长时间处于停滞状态以致难以传代；
3. 有细胞增殖，传若干代后停止生长或衰退死亡；
4. 传数代后细胞增殖缓慢，经过一段停滞期后，才又呈旺盛生长状态，形成稳定生长的肿瘤传代细胞系。
以上现象说明肿瘤细胞对体外生存条件有较高的要求，并需经过对新环境的适应才能生长，因此欲获得好的培养效果，不能局限于一般培养法，必须采用一些特殊的措施。
材料与仪器
瘤组织
Hanks
棉球
Hanks
棉球
步骤
一、适宜底物
如：把经过纯化的细胞接种在不同的底物上，如鼠尾胶原底层、饲细胞层等。
二、生长因子
应用促细胞生长因子，向培养液中增加一种或几种促细胞生长因子。根据细胞种类不同选用不同的促生长物，常用有胰岛素、氢化可的松、雌激素以及其它生长因子。
三、动物体媒介培养
为提高肿瘤细胞对体外培养环境的适应力和增加有活力癌细胞（干细胞）的数量，可采用动物体转嫁接种成瘤后，再从动物体内取出进行培养，能提高体外培养的成功率。受体动物以裸鼠最好。
1. 瘤块接种
取新鲜瘤组织，用Hanks液洗净血污，切成1~3 毫米小块，用穿刺针头吸一小瘤块，用酒精棉球擦拭动物腋部后，直接刺入皮下，注入瘤块。
2. 饲养观察，待肿瘤生长达较大体积后，剥取出瘤组织。
3. 进行体外培养。
4. 为防止失败，仍取部分瘤组织继续在裸鼠体内传代。通过裸鼠媒介接种，有活力的肿瘤细胞数量增多，细胞培养易于成功。
如：把经过纯化的细胞接种在不同的底物上，如鼠尾胶原底层、饲细胞层等。
二、生长因子
应用促细胞生长因子，向培养液中增加一种或几种促细胞生长因子。根据细胞种类不同选用不同的促生长物，常用有胰岛素、氢化可的松、雌激素以及其它生长因子。
三、动物体媒介培养
为提高肿瘤细胞对体外培养环境的适应力和增加有活力癌细胞（干细胞）的数量，可采用动物体转嫁接种成瘤后，再从动物体内取出进行培养，能提高体外培养的成功率。受体动物以裸鼠最好。
1. 瘤块接种
取新鲜瘤组织，用Hanks液洗净血污，切成1~3 毫米小块，用穿刺针头吸一小瘤块，用酒精棉球擦拭动物腋部后，直接刺入皮下，注入瘤块。
2. 饲养观察，待肿瘤生长达较大体积后，剥取出瘤组织。
3. 进行体外培养。
4. 为防止失败，仍取部分瘤组织继续在裸鼠体内传代。通过裸鼠媒介接种，有活力的肿瘤细胞数量增多，细胞培养易于成功。
肿瘤细胞培养方法与培养正常细胞完全相同，但成功率比正常细胞高。
来源：丁香实验
