小鼠肺泡巨噬细胞用lip3000转染效果如何？转染条件是什么？

转染得成功率还是比较理想的，推荐使用电转染

转染条件：

1.接种细胞至70-90%汇合度时转染

2.使用Opti-MEM培养基稀释Lipofectamine?3000试剂(2管)，充分混匀

3. 使用Opti-MEM培养基稀释DNA，制备DNA预混液，然后添加P3000?试剂，充分混匀。

4. 在每管已稀释的Lipofectamine?3000试剂中加入稀释的DNA (1:1比例)

5.室温孵育5分钟。

以下是可能适用于小鼠肺泡巨噬细胞的Lip3000转染条件：

细胞密度: 小鼠肺泡巨噬细胞的密度应在转染前达到70-80%的接近完全密度。

DNA/Lip3000比例: 建议使用0.5-1 μg DNA与1 μl Lip3000的比例。

培养基: 用含10%胎牛血清的DMEM培养基进行转染。

转染时间: 转染时间应在4-6小时内。

转染复合物浓度: 建议使用转染复合物浓度不超过5μg/ml。

在转染前，可以对不同比例的Lip3000和DNA进行优化实验，以确定最适合小鼠肺泡巨噬细胞的转染条件。

需要注意的是，即使使用最佳条件，Lip3000转染对细胞的影响可能仍然是有毒的。因此，应尽量缩短转染时间，并在转染后尽早更换含有10%胎牛血清的培养基。

lip3000转染的话效果还是很不错的