COS-7转染条件

yangbinxia：有没有人用脂质体转染过COS-7细胞呀？我看invergen lipofectamin 2000说明书上说这个细胞系转染效率99%，但我用GFP转染后40小时荧光显微镜下观察转染效率没有那么高仅有30－40%吧。可能我的转染条件不太好，我用的转染体系是1μg质粒加2μl脂质体/孔（24孔板）转染前一小时换无血清DMEM，转染后4小时换上10%FBS 的培养基。阳性对照是293T 转染效率很高，请各位高手帮我分析一下怎样改变条件才能达到说明书上的转染效率。

丁香园网友可时认为：

我来说说我的意见吧：

１　lipofectamin 2000用前是否混匀

２　不知道你用培养基孵育lipofectamin 2000的时间是多久？lipofectamin 2000说明书上说，如果使用ＤＭＥＭ培养基稀释lipofectamin 2000，需要在５min之内将其与稀释好的ＤＮＡ混匀，培养基长时间孵育lipofectamin 2000会使其活性降低

３　ＧＦＰ质粒是否纯？

希望对你有帮助