求助THP-1细胞相关问题

芒果遇上梨

2023-02-09

因为THP1细胞需要使用PMA才能诱导成巨噬细胞

1，如果对THP1细胞进行转染，是否是在使用PMA将THP1细胞诱导成巨噬细胞后，再进行转染？

2、如果使用病毒感染，构建稳定细胞系又该如何操作呢？也是在PMA诱导后，再进行病毒感染,然后筛选？最后收集冻存的稳定细胞系，复苏后还需要再加入PMA诱导成巨噬细胞吗？

3，THP1细胞长到哪种状态时可使用PMA进行诱导，PMA浓度？诱导时间？

4，经PMA诱导的THP1细胞，是否不在不加入PMA的情况下也一直保持贴壁，传代后也不需要再加PMA?

5，贴壁的细胞能直接用于传代培养吗？如果可以，不继续加入PMA，此时还能贴壁吗？

问题有点多，麻烦大家了

毛利小五郎的徒弟

2023-02-11

有帮助

贴壁的细胞可以直接用于传代培养，不需要继续加入PMA。

huarenqiang5

2023-02-11

有帮助

经PMA诱导的THP1细胞，不加入 PMA时也可以保持贴壁，传代后也可以不加PMA。

loveliufudan

2023-02-09

有帮助

1、如果对THP1细胞进行转染，需要先使用PMA诱导成巨噬细胞，再进行转染，这样可以使得转染的效率更高。

2、如果使用病毒感染，则需要在PMA诱导后再进行病毒感染，筛选后稳定细胞系，最后再冻存。如果在复苏后要求细胞处于巨噬细胞状态，则需要再加入PMA进行诱导。

3、关于PMA诱导THP1细胞的浓度和时间，需要根据实验具体要求进行调整，通常使用10-100ng/ml的PMA，诱导时间为48-72h。

4、诱导后的THP1细胞一般不再需要加入PMA，但是需要进行实验验证。

5、贴壁的细胞一般可以直接用于传代培养，如果不加入PMA，细胞是否仍然能够贴壁，也需要根据实验结果来决定。