求助|细胞加药时机
蜡笔小迟
我想请教下各位大虾：如果我加药后看24h以内的作用，细胞长不起来，是不是应该加药的时候细胞长得满一点，70%-80%可以吗？如果看时间长一点的作用，细胞能长的很满，是不是应该加药的时候细胞长得比较少？50%-60%？如果我看加药后2h到72h的作用，是不是应该根据时间掌握不同的加药时机？（24h内70-80%，24h后50-60%？）这样加药时机不同会不会导致对药的反应不一致？多谢各位指导！
3 个回答
balalaLy
可能是你的药物浓度太高了，细胞少的时候就长不起来。一般是加药的时候在50-60%的汇合度，观察24-72h的情况。
毛利小五郎的徒弟
首次加药细胞密度高一点最好在80%左右
huarenqiang5
每个细胞都不一样，一般是细胞长到80%的时候可以铺板
你可以先做个生长曲线，确定最佳的铺板密度和生长时间，比如PC12就加药6小时就行，而Sao-2需要48小时，一般你可以试试培养12小时
你是一次性把细胞接种到6孔板或12孔板中吧
做药物时间实验, 一般采取"倒叙法". 假设要检测0到72小时药物处理的细胞, 每24小时为一个点. 操作：
1. 以一定密度种细胞各个时间的和重复的细胞一起种上，带细胞贴壁后。
2.加药用培养基（溶解药的培养基）
第一天(72小时点): 加药用培养培养基与处理72小时, 设3个以上平行孔.（六孔板的话可以同时做三个）
第二天(48小时点): 同上操作
第三天(24 小时点): 同上操作
第四天(0 小时点): 同上操作。其实这个就到了处理时间了。
注意的问题：
1.细胞密度问题，三天之内基本长到板底90---98%，所以你的知道细胞增长速度。
2.加药后，药用培养基的最终浓度。
3.种细胞的时候培养液最好是终体积的一半，这样就可以加一半2倍浓度的药用培养液了。个人建议终体积2----2.5ml。
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