求助|细胞加药时机

可能是你的药物浓度太高了，细胞少的时候就长不起来。一般是加药的时候在50-60%的汇合度，观察24-72h的情况。

首次加药细胞密度高一点最好在80%左右

每个细胞都不一样，一般是细胞长到80%的时候可以铺板

你可以先做个生长曲线，确定最佳的铺板密度和生长时间，比如PC12就加药6小时就行，而Sao-2需要48小时，一般你可以试试培养12小时

你是一次性把细胞接种到6孔板或12孔板中吧

做药物时间实验, 一般采取"倒叙法". 假设要检测0到72小时药物处理的细胞, 每24小时为一个点. 操作：

1. 以一定密度种细胞各个时间的和重复的细胞一起种上，带细胞贴壁后。

2.加药用培养基（溶解药的培养基）

第一天(72小时点): 加药用培养培养基与处理72小时, 设3个以上平行孔.（六孔板的话可以同时做三个）

第二天(48小时点): 同上操作

第三天(24 小时点): 同上操作

第四天(0 小时点): 同上操作。其实这个就到了处理时间了。

注意的问题：

1.细胞密度问题，三天之内基本长到板底90---98%，所以你的知道细胞增长速度。

2.加药后，药用培养基的最终浓度。

3.种细胞的时候培养液最好是终体积的一半，这样就可以加一半2倍浓度的药用培养液了。个人建议终体积2----2.5ml。