dxy_9103rhh9
请问各位前辈有没有做体外CD8+T细胞和肿瘤细胞共培养的实验的?在下有几个问题,就是我用的是基因小鼠的脾脏通过磁珠分选提取出的cd8细胞,并且在体外用cd3/cd28和IL-2进行了激活,然后想用激活后的cd8细胞和鼠源的肿瘤细胞共培养,检测对肿瘤细胞的杀伤作用(特异性裂解率,凋亡等)。那么怎么完成两种细胞的共培养呢?因为我先是分别培养之后放在一起培养24h,但是并没有发生杀伤,这种情况是激活的cd8细胞无法识别肿瘤细胞么,该如何解决?我看有的文献用的是ot1 和ova配对,但是我的cd8细胞是基因敲除后的,所以无法使用ot1的cd8细胞。如上,请各位赐教
Dr_劉医生
可以参考文献用的是ot1 和ova配对,T细胞发挥杀伤作用就是要TCR-MHC-I特异性识别 OT1和OVA,就是改造出来给他们配对的
毛利小五郎的徒弟
先是分别培养之后放在一起培养,然后加入激活因子激活cd8细胞