cubeamy1905
我想要通过划痕实验评估敲低目的基因后细胞的迁移能力。之前是直接把对照组和敲低组直接铺同一个12孔板的,但是敲低组的细胞在转染24小时后会死掉一部分,细胞数和对照组就匹配不上了,再做划痕24小时后就明显比对照组宽。我想问问,我能否先进行转染,24小时后将对照组和转染组消化下来计数,重新铺12孔板再做划痕呢?
毛利小五郎的徒弟
可以先进行转染,24小时后将对照组和转染组消化下来计数,重新铺12孔板再做划痕。
天一湖医者
对转染shRNA的细胞进行消化传代,是会影响转染效果的。
huarenqiang5
有一定影响,你可以在细胞融合度达到40%-50%后,进行转染,这样即使用10%培养基,一般也能继续培养3天。
balalaLy
你是做瞬转的吧,最简单的是你用6cm盘做转染,24小时后消化铺两个12孔板,一个做划痕一个做pcr验证转染效率。
Dr_劉医生
不会,影响转染效果的更多是细胞污染,注意无菌,胰蛋白酶消化没加太多,保障细胞活性。
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