【交流】转染对细胞周期会有影响吗?
丁香园论坛
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各位师兄师姐,本人在实验当中碰到一问题,不知道如何让解释好,想请教一下。实验设计向一肿瘤细胞株中转入一外源基因,采用瞬时转染的方法,流式检测对细胞周期的影响,结果如下:
转染48h
G0/G1(%) S(%) G2/M(%)
未转染组 62.16 30.11 7.72
空载体组 52.38 28.78 18.84
目的基因组 54.15 20.85 25.00
G0/G1(%) S(%) G2/M(%)
未转染组 65.85 29.42 4.73
空载体组 53.40 34.40 12.21
目的基因组 55.66 35.46 8.88
转染72h
G0/G1(%) S(%) G2/M(%)
未转染组
67.91 18.6 13.48
76.56 16.3 7.14
空载体组 52.01 32.01 15.95
目的基因组 56.06 43.21 0.73
56.33 29.33 14.34
采用配对T检验发现,目的基因组与空载体组相比处于G1期的细胞比例无显著差异,而此两组与未转染组相比均有显著差异,表现为进入分裂期细胞比例增多。现有两个问题:1、我们预测的该转入基因对细胞有G1期阻滞的作用,但并未发现,是该基因本身的作用不强还是由于转染过程的因素,转染效率,检测时间?2、转染本身能促进细胞进入分裂期吗?还是脂质体对细胞的毒性作用杀死一部分细胞,而致剩下的细胞进入分裂期?盼望热心的师兄师姐给予解惑,谢谢。
转染48h
G0/G1(%) S(%) G2/M(%)
未转染组 62.16 30.11 7.72
空载体组 52.38 28.78 18.84
目的基因组 54.15 20.85 25.00
G0/G1(%) S(%) G2/M(%)
未转染组 65.85 29.42 4.73
空载体组 53.40 34.40 12.21
目的基因组 55.66 35.46 8.88
转染72h
G0/G1(%) S(%) G2/M(%)
未转染组
67.91 18.6 13.48
76.56 16.3 7.14
空载体组 52.01 32.01 15.95
目的基因组 56.06 43.21 0.73
56.33 29.33 14.34
采用配对T检验发现,目的基因组与空载体组相比处于G1期的细胞比例无显著差异,而此两组与未转染组相比均有显著差异,表现为进入分裂期细胞比例增多。现有两个问题:1、我们预测的该转入基因对细胞有G1期阻滞的作用,但并未发现,是该基因本身的作用不强还是由于转染过程的因素,转染效率,检测时间?2、转染本身能促进细胞进入分裂期吗?还是脂质体对细胞的毒性作用杀死一部分细胞,而致剩下的细胞进入分裂期?盼望热心的师兄师姐给予解惑,谢谢。