噗噗噗哈哈嗝
小白求问😂消化细胞的时候比课题组的姐姐们多消化了十几秒 当时细胞都哗哗掉下来了 然后现在几瓶传代后的有一些细胞就死了 飘来飘去 感觉长得也比以前慢 非常担心会不会之后全死了 还有没有可能挽救……哭了😭
huarenqiang5
一般细胞消化到掉下来是没问题的。如果针对你这种细胞来说是消过了的话,那接下来最要紧的是立刻加入培养基终止胰酶对细胞的继续作用,而不是用直接用胰酶吹打。加入培养基的量约为胰酶的1-2倍,然后离心去上清,培养基重悬,这时应该注意将细胞吹散,因为一般胰酶消化过度之后细胞容易聚集成团,不吹散的话会严重影响细胞状态。吹打不宜过猛,20下左右,肉眼完全看不到颗粒状悬浮后再吹几下就行。另外,细胞状态不好有的可以恢复,有的不能恢复。如果是可以恢复的你只要好好继续培养就行;而不能恢复的话状态不好的细胞以后会挂,换液除去漂浮的死细胞就行了,一般不用特意去除状态不好的细胞。
NatureBios
胰酶本身就是用来消化细胞和培养瓶的连接的蛋白,多10s会有些影响,不过不会很大的,正常养细胞也会有细胞死亡,将死细胞去除掉,剩下的好好养就可以了
balalaLy
十几秒还好吧。可能你的细胞本身比较容易消化下来。但多这十几秒不至于就会把细胞消化死了。可能是你其它的操作上存在问题。比如有没有污染了,细胞密度合不合适,有些细胞太稀的话会长很慢。