细胞消化过度的问题

丁香园网友mmlirx的问题为：

我的细胞消化多度了，当时看到都哗哗的往下掉了。现在养了两天，有些飘起来，也有两三个聚在一起，也有挺多帖璧的，但是感觉状态还不好。由于科室没有此细胞的冻存，所以得养好。大哥大姐，现在有有什么好的办法补救下？

丁香园网友wxgang的观点为：

马上用培养基中和，用吸管吹打细胞，收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清，用全培重悬，换新的培养瓶继续培养！！状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落，在换液的时候可以清除掉！！

胰酶过度消化造成细胞壁的损伤可以在细胞培养的过程中自己可以修复的！

丁香园网友emilymu825的观点为：

一般细胞消化到掉下来是没问题的。如果针对你这种细胞来说是消过了的话，那接下来最要紧的是立刻加入培养基终止胰酶对细胞的继续作用，而不是用直接用胰酶吹打。加入培养基的量约为胰酶的1-2倍，然后离心去上清，培养基重悬，这时应该注意将细胞吹散，因为一般胰酶消化过度之后细胞容易聚集成团，不吹散的话会严重影响细胞状态。吹打不宜过猛，20下左右，肉眼完全看不到颗粒状悬浮后再吹几下就行（当然你视力要好^^）。

另外，细胞状态不好有的可以恢复，有的不能恢复。如果是可以恢复的你只要好好继续培养就行；而不能恢复的话状态不好的细胞以后会挂，换液除去漂浮的死细胞就行了，一般不用特意去除状态不好的细胞。

丁香园网友tzhiling的问题为：

我最近在培养肝星状细胞，每次传代时用胰酶消化，不到一两分钟，细胞就成片状漂起。让老师帮我传代也是，细胞一起子就漂起来了，她说假如难以把握消化程度的话，让我把细胞全部消化下来再离心。全部消化下来是什么意思？但是细胞成片状漂起是不是细胞已经消化过度了呢？对细胞影响还是很大的吧，比如说影响贴壁和活力。请教各位高手。

丁香园网友eric2231的观点为：

消化过度对细胞是有一定影响的。

可以采取加入小量血清抵抗胰酶的作用。

我的对待这种情况时具体操作如下；

加入少许血清，之后加入适量的 培养液，充分吹打成单细胞，之后转移到灭菌的离心管中，封口膜封住，1000转左右，离心5分钟，小心的倾去上清，加入适量培养液，重新吹打成单细胞，之后正常操作 。