微管免疫荧光染色
是小张哈
求助：我染出来的微管不成网状结构，整个细胞中全都有，而且星星点点的，连不成丝，还不知道问题出在哪儿。
实验步骤：
1 固定：室温4%多聚甲醛 15分钟
2通透：0.3%Triton 室温 10分钟
3 封闭：1%BSA 室温1小时
二抗（1：200）1小时
下面是我染色的片子
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3 个回答
申东熙老伯
有帮助
可能是封闭问题，用5%的BSA或者山羊血清封闭。
dxyc42u
有帮助
二抗就是荧光染料，只要加了二抗，就会有荧光的产生，所以需要在加完二抗后用PBS洗5次，充分将多余二抗洗掉，避免在拍片时产生躁点影响实验结果。
土井挞克树
有帮助
首先二抗时间孵育有点长，二抗的选择存在非特异性。其实固定可以适当加pbs，效果好一些。
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