是小张哈
求助:我染出来的微管不成网状结构,整个细胞中全都有,而且星星点点的,连不成丝,还不知道问题出在哪儿。
实验步骤:
1 固定:室温4%多聚甲醛 15分钟
2通透:0.3%Triton 室温 10分钟
3 封闭:1%BSA 室温1小时
二抗(1:200)1小时
下面是我染色的片子
申东熙老伯
可能是封闭问题,用5%的BSA或者山羊血清封闭。
dxyc42u
二抗就是荧光染料,只要加了二抗,就会有荧光的产生,所以需要在加完二抗后用PBS洗5次,充分将多余二抗洗掉,避免在拍片时产生躁点影响实验结果。
毛利小五郎的徒弟
首先二抗时间孵育有点长,二抗的选择存在非特异性。其实固定可以适当加pbs,效果好一些。
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