蛋白酶在枯草中表达

我用的质粒是pHT43-His，想在枯草中表达，但是从电转化出来的挑取单菌落划线发现带有抗性的板上不长，但是用划线剩下的菌做菌P，又出现条带了，只是有的亮有的暗，这是怎么回事呢，我用的抗生素是氨苄，在枯草中应该用氯霉素吗