如何配制10%的DMEM呢？请大神指教

wwxxyy01

2022-10-23

wildC8OG

2022-10-24

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89毫升的DMEM，加10毫升胎牛血清，在家1毫升的双抗即可，要在显微操作台，无菌环境下操作

毛利小五郎的徒弟

2022-10-24

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10%DMEM培养基的配制

一、实验目的：掌握DMEM培养基配制方法及注意事项

二、实验材料：灭菌溶液瓶，剪刀，小烧杯[溶解碳酸氢钠]，PH试纸，磁力搅拌器[磁头应灭菌]，灭菌滤器[带滤膜]，DMEM粉状培养基，无菌三蒸水

三、操作流程：

1、取700～800ml的三蒸水，加入磁棒；

2、将粉状培养基加入其中，清洗袋子内壁2-3次，磁力搅拌器搅拌30min；

3、用碳酸氢钠溶解到烧杯中（浓度为5.6%）再缓缓加入防止局部过碱，调整溶液的PH值至7.1-7.2，加三蒸水定容至1000ml；

4、将灭菌后的滤器上紧螺丝安装支架连双连球上口加培养基打开下口包装纸加压过滤，前20毫升弃去。注意事项：1、用新制备的三蒸水，严格无菌操作；

2、保证培养液中各成分完全溶解。 (判断方法：将培养液置室温或4℃冰箱30分钟后，观察瓶底有无颗粒产生)

3、由于在高压灭菌后PH会降低0.1-0.2，过滤除菌后会升高0.1-0.2，所以PH值要根据实际情况调整。

0.1%胰蛋白酶：胰蛋白酶、PBS、盐水瓶、磁力搅拌器、正压桶式滤器称量1g胰蛋白酶溶解于1L已灭菌的PBS中，磁力搅拌器搅拌助溶，在超净工作台下过滤分装。

linatdns

2022-10-24

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常用的配比方式：1%的谷胺酰胺，1%双抗，10%的胎牛血清，88%的DMEM（购买的DMEM试剂有的含谷胺酰胺，也可以选择不额外加1%）。具体的以配50ml培养基为500ul谷胺酰胺，500ul双抗，5ml的胎牛血清，44mlDMEM。

bamboopiggy

2022-10-24

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是指血清10%的DMEM，就是9体积的dmem加一体积的血清。如果要加1%的双抗，就再减少1%的dmem

汤姆卜丽波

2022-10-24

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液体DMEM加10%血清，粉状的要用ddH2O配，配好调PH值，然后0.22uM滤膜过滤除菌，再加10%血清

balalaLy

2022-10-23

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10%的DMEM是含10%FBS的DMEM吧？500ml dmem加50ml FBS就是10%了

申东熙老伯

2022-10-23

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是配置10%FBS的DMEM还是配置10%的DMEM？一般DMEM可以直接买成品。10%FBS的DMEM就是倒出来50毫升的DMEM，加入45毫升的FBS。