用六孔板培养细胞，每次提的rna的非常少，转染后可以让细胞长的非常密再提吗

可以用PBS洗掉培养基后，不用胰酶消化，直接在六孔板中加入trizol裂解。

可以，六孔板细胞张满后能达到1E6以上

如果长到80%提的话肯定好些，但也可以用PBS洗掉培养基后，不用胰酶消化，直接在六孔板中加入trizol裂解。

一般用12孔板提的RNA量都挺高的，6孔板提还低，可能是你的操作有问题。乙醇有没有挥发干净，溶解的时候有没有充分溶解？转染的时候细胞不能太密，60%-70%左右，太密了转染效率会很低。转染后提RNA的时候细胞可以密一点没有影响

取决于转染的方法，以及你的研究目的。lipo这种短时间的转染，等你细胞长满了，会不会已经过了有效时限？但另一方面，为啥不在60-70 汇合度的时候进行转染？一般长到这个程度的细胞量，应该勉强够用来做后续的实验了。

如果是慢病毒这类持续时间很长的，可以在抗生素筛选后，维持前来提rna，这个时间挺长的，足够得到足够的细胞量了。

至于能不能等长满，得看长满会不会影响你要测量的指标。confluent的细胞和 in log phase的细胞，在转录水平和表达水平的状态是不一样的，请知悉。

可以等细胞密度长好了再提，但建议你在培养细胞和提取RNA的时候把步骤优化一下，不然后续光等细胞长好很容易出错，一方面收到转染效率的影响，另一方面转染后的细胞存活率也有影响；