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为什么HepG2细胞在96孔板中长不起来?

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leeAYZ9

HepG2细胞在75T培养瓶和6cm皿中状态不错,为什么种在96孔板中细胞不长(每孔种5000个细胞,24小时后加药,在培养24h,用MTT测细胞活力,结果对照组的吸光值在0.2左右)

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7 个回答

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生如夏花zzh

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在加孔之前要吹匀,细胞活力也很重要。把细胞加入96孔板之前需要吹匀,加的均匀一点

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喵喵喵柏

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看一下自己在重传到96孔板之前细胞的生长状态好不好?有可能是细胞生长状态的原因

还可能和自己铺板的密度有关,把细胞加入96孔板之前需要吹匀,加的均匀一点

细胞生长,有时会出现密度依赖性的情况。如果种版的密度比较低,也可能出现这种情况

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whilt-shirt

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一般铺板后都是直接给刺激,而且铺板后都给无血清的培养基

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未来9

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长的慢可能和培养基和血清都有关系,合适的培养基很重要,此外,进口澳洲血清比美洲或墨西哥以及国产血清效果都要好,不过细胞经过两三代驯化后,长势也还可以

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vae1476

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你是如何判断他不长的?仅仅是通过M T T的结果?如果显微镜下观察细胞是有的话,那可能是M TT的操作有问题,如果显微镜下也没有,那考虑一下是不是计数的问题。

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bamboopiggy

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可能是你处理过程中,胰酶消化时间长了,因为5k,96孔板,hepG2是可以长的

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dxy_gwrp7ndq

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原因主要是种板后的细胞悬液温度为室温,培养箱的温度为37度,96孔板放进培养箱,由于导热的问题,边缘部分温度升的快,细胞本身由于向有利条件生长的趋向,加上刚种板细胞贴壁不牢,所以会往边缘聚集,造成不均的现象;中间的孔由于位置的关系,受热缓慢而且均匀,所以不存在这个问题。


解决的方法很简单,种板后把细胞平放在室温下30min~1h,再转移到培养箱,主要目的是让细胞初步贴壁之后,再转移到培养箱,能较好的解决96孔生长不均的情况。
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