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求助|3T3-L1脂肪细胞换液频繁

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毕业不头秃

3T3-L1前脂肪细胞进入诱导期后,培养基消耗得特别快,刚开始一天一换,一天内就全部变黄了,后来加到一天两换,换液时也是看到培养基颜色明显变浅

文献里说的都是隔天换液或者2,3天一换,没有我这么频繁

有无大佬养过这个细胞指导一下,一天两换真的会累死

附上诱导protocol

接触抑制2d

诱导剂1(FBS完全培养基含0.5mM IBMX, 1mM DEX, 10ug/ml INS)2d

诱导剂II(FBS完全培养基含10ug/ml INS)7d

分化后脂肪细胞效果如图

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5 个回答

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口腔种植2yy

有帮助

请问同学,你现在找到解决方案了吗?

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Gx41

有帮助

可以减少点细胞数量,增加培养基的量

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毕业不头秃user-title

分化是接触抑制2天后再开始诱导,不知具体如何控制细胞数量呢?

6孔板,单孔最多加过4ml,勉强能撑一天,但听说加太多,会影响细胞的氧气交换,又减回2ml了

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Eason老歌迷

有帮助

你的换液太频繁了!我感觉培养基里不是有酚红吗?它是会变色的,最好是在培养箱里稳定一段时间后拿出来观察培养基颜色为准。

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毕业不头秃user-title

是的,就是每次看培养基已经黄得不得了了,就换液,最后就每天2换了

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秋秋欣欣

有帮助

你换液是多加你点培养基呢,稍微有点变黄不影响状态其实没关系

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毕业不头秃user-title

试过偷懒超过24h没换,结果第二天培养基黄得彻底,细胞全飘起来了。。。

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申东熙老伯

有帮助

下次诱导可以控制一下细胞数量,现在的话,不要一天几次换液这么频繁,培养基变黄也一天一次,可以增加几毫升培养基的量。

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毕业不头秃user-title

主要是分化方案,是接触抑制2天后开始诱导,那会都长得特别满了,我觉得控制不了细胞量吧,培养基有试过多加,可以撑过1天,但6孔板一般每孔2ml,我加到过4ml的,但怕细胞会缺氧。

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