膜片钳破膜

是不是电极内液不行了，你重新配一下，注意ph，和渗透压。

我感觉细胞状态是最大的问题，另外接触细胞之后压电极的速度和程度也有些关系，前者需要在你培养和转染条件上多考虑，后者就是手感了~~lipo2000说明书上建议的总质粒：lipo是1:2，但我做过条件优化，我转染用的比例是1:1。当然也要看你转多少个质粒，质粒浓度是多少，因为lipo多了细胞容易死。细胞密度我用70%左右，我的是HEK293B细胞，细胞周期较小，间隔时间就稍微短，理论上越接近对数期越好，现在基本上也都是肉眼辨别。

负压破膜，293T的细胞状态要保持好，然后只能多练了。