Dfcaizjm
麻烦问一下怎么把板重复做好呢,铺的挺均匀的,但是重复很差,孔里的细胞量不一样,我是稀释好,放到50ml离心管中,用1000 微升的移液枪吹打,吹打200下大概,然后每个孔加100微升,悬空垂直加入,加的时候是一档加,每6个孔换一个枪头,再用1000微升的移液枪吹打100下,然后再加到孔里,有的板子重复还可以,但是有的就不行,怎么才能保证一样啊,求大神指点一下,谢谢
伟点丽
细胞反复吹打对细胞活性也有一定的影响,单枪加平行孔之间会有偏差,可以用排枪加细胞悬液,保持平行孔的平行性
Eason老歌迷
铺的很均匀,但是还是数量长的不一样,说明还是没有操作好。从6孔板到96孔板,细胞应均匀分布分散。用培养基进行稀释细胞,然后将培养板放置在适当的位置。添加一个细胞之后,请勿移动能力培养板;如果在空气中没有介质吹入,但是不要移动培养板,加入细胞后,静置20-30分钟,然后可以将其移入培养箱。这样,细胞结构通常具有均匀生长。当然,前提是细胞消化系统良好。
天一湖医者
如果出现这种情况,我们建议你从以下几个方面考虑一下原因:
1,用来铺板的细胞状态本身就不好。
2,用来铺板的细胞传代次数太多,有些老化。
3,胰酶消化时间过长。
4,中和的血清量及时间不够。
5,支原体污染。 细胞铺板是一个经验积累的过程,你的手法也需要积极的改进,不要生搬硬套,也不要一味追求绝对的铺均匀,在实验过程中多思考细胞本身的特征和属性,出现问题积极解决即可。
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