细胞毒性分析

细胞实验

最新修订时间：2023-03-23

简介

检测细胞增殖、细胞毒性

原理

该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

应用

药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验

来源：丁香实验

操作方法

🔥 细胞毒性分析（CCK-8 法）

细胞毒性是指由细胞或化学物质引起的单纯细胞杀伤事件，不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。常用细胞毒性检测方法有 CCK-8 法、MTT 法、LDH 法。1、与 MTT 法相比：1）CCK-8 使用更为方便，无需洗涤细胞；2）CCK-8 法能快速检测；CCK-8 法的检测线性范围广，灵敏度更高；4）CCK-8 法的重复性更好，MTT 实验生成的 formazan 不是水溶性的，需要使用 DMSO 等

LPS 诱导细胞炎症 cck8 实验重复性差

1. 种植于 96 孔板中的细胞保证密度合适、细胞状态良好，8000-10000 个/孔细胞数量比较合适，也要看实验时间及个人培养的细胞生长速度；2. 加入 CCK-8 试剂时，枪头伸入液体以下迅速将 CCK-8 试剂加入培养基中，减少试剂在枪头残留，且要避免产生气泡，减少操作的误差，有条件建议使用多通道移液枪加 CCK-8 试剂，尽量减少每个孔之间的时间误差；3. 探索 CCK-8 最佳孵育时间