T清风自来
请问通过给细胞添加不同种类及浓度的氨基酸来检测细胞中酪蛋白的含量及表达情况,利用ELISA试剂盒进行检测时,如何收集细胞上清进行检测?酪蛋白是分泌蛋白,在细胞培养过程中需换液时就会影响上清中酪蛋白的浓度,那么何时收集细胞上清进行检测能达到试验需要的结果呢?
天一湖医者
1、取细胞培养上清液500ul; 2、4度,6000rpm离心5-10min; 3、取上清。是细胞分泌的蛋白的话,直接在培养皿中铺入一定量的细胞,培养3天,细胞达到80-90%时,收取细胞培养上清液,离心去除沉淀,取上清测定浓度,用于ELISA检测。对照组为新鲜培养液。
Eason老歌迷
分情况,看你培养的细胞是啥类型,要是单层贴壁细胞表达上清,可以用移液器移取。要是悬浮细胞,需要对细胞进行离心然后获得上清。