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细胞上清外泌体提取图解

宇玫博

2736

细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程

1.核对样本

2.离心,3000g,15min;

3.离心后样本(有略微沉淀)

4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂;

ECS 与试剂有明显分层;

震荡混匀;

5.在 4 度冰箱静置 2H 以上,离心 10000g,60min;

6.离心后的样本(沉淀明显,沉淀中富含外泌体)

将上清吸出留下沉淀,将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液;

7.加 PBS 重悬沉淀;

用 PBS 洗脱后的沉淀

8.离心进一步去除杂质(12000g,2min);

离心后的样本(管壁有略微沉淀);

若沉淀较多,可 12000g,2min 重复离心 2 ~ 3 次;

9.将上清移入 EPF 柱(样本在上柱),离心,3000g,10min;

离心后,Exosome 样本在下柱,若出现堵住现象,可能是样本中杂质较多,未去杂完全,可将上柱样本吸出,12000g/2min 重复离心后保留上清液,再过柱子。

将下柱样本转移至新的 EP 管;

文章图文来源:宇玫博生物

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