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内质网分离的条件,速度和时间是多少呀?

相关实验:细胞成分分离实验

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小狗瑞纳冰

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4 个回答

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dxywode

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如果只是从内质网中提蛋白的话,你超3到4个5s左右就行了,其实如果用比较强的lysis组合,不用超声,votex估计也差不多了.

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bamboopiggy

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传统分离内质网的方法是基于密度梯度超离心,但是需要大量起始样品,最好买个试剂盒。

差速离心(differential centrifugation)是在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。 在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为:细胞核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高尔基体、最后为核糖体。

将溶液加在1.3 M的蔗糖溶液上, 在237,000 g 离心2小时,此次离心将粗面内质网(沉淀中)和 光面内质网分离开来,后者位于0.25-1.3 M 的界面。将可溶性组分用0.25 M的蔗糖溶液以1:1 稀释并在124,000 g离心60分钟。 光面内质网可在沉淀中回收到并将其储存 。

你要看具体的到:http://www.labome.cn/method/Subcellular-Fractionation.html

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未来9

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4℃超速离心机再次离心60分钟,速度为100000g小心抽去上清液,保留沉淀颗粒――此步骤获得内质网组分

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天一湖医者

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时间为10min,速度为300

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