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血清:DMSO=9:1
完全培养基:血清:DMSO=7:2:1
bamboopiggy
只要有血清,有5-10%的dmso,每个实验室的配方都不太一样。有的喜欢直接血清加dmso,有的是完全培养基血清dmso,有的认为完全培养基里有双抗。提议用单纯培养基加血清加dmso,看实验习惯,其实只要能复苏活了,哪种都行
天一湖医者
细胞冻存液的配方
1. 配置含10%DMSO或凡士林、10~20%小牛血清的冻存细胞培养液;
2. 取对数成长期的体细胞,除去旧细胞培养液,用PBS清理。
3. 除去PBS,添加适量蛋白酶(遮盖细胞培养皿表层)把单面生长发育的体细胞消化吸收出来;
4. 抽滤1000rpm,5min;
5. 除去蛋白酶,添加适量配置好的冻存细胞培养液,用塑料吸管轻轻地吹打使体细胞匀称,记数,调整冻存液中体细胞的后相对密度为5牙周106/ml~1牙周107/ml;
6. 将体细胞分装进冻存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在冻存管上标出体细胞的名字,冻存時间及作业者;
8. 冻存:标准的冻存程序流程为减温速度-1~-2℃/min;当溫度达-25℃下列时,可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可快速渗入液态氮中。也可将配有体细胞的冻存管放进-20℃电冰箱2h,随后放进-70℃电冰箱中留宿,取下冻存管,移进液氮容器内。
未来9
通用细胞冻存液:以FBS、DMSO 为主要原材料配制
不同配方的区别主要体现在:价格、使用便捷性、保存条件等