丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

细胞冻存液怎样配置,不同的配方有什么区别吗?

user-title

dxy_c6k4iiy3

血清:DMSO=9:1

完全培养基:血清:DMSO=7:2:1

wx-share
分享

3 个回答

user-title

bamboopiggy

有帮助

只要有血清,有5-10%的dmso,每个实验室的配方都不太一样。有的喜欢直接血清加dmso,有的是完全培养基血清dmso,有的认为完全培养基里有双抗。提议用单纯培养基加血清加dmso,看实验习惯,其实只要能复苏活了,哪种都行

user-title

天一湖医者

有帮助

细胞冻存液的配方

  1. 配置含10%DMSO或凡士林、10~20%小牛血清的冻存细胞培养液;

  2. 取对数成长期的体细胞,除去旧细胞培养液,用PBS清理。

  3. 除去PBS,添加适量蛋白酶(遮盖细胞培养皿表层)把单面生长发育的体细胞消化吸收出来;

  4. 抽滤1000rpm,5min;

  5. 除去蛋白酶,添加适量配置好的冻存细胞培养液,用塑料吸管轻轻地吹打使体细胞匀称,记数,调整冻存液中体细胞的后相对密度为5牙周106/ml~1牙周107/ml;

  6. 将体细胞分装进冻存管中,每管1~1.5 ml;

  7. 在冻存管上标出体细胞的名字,冻存時间及作业者;

  8. 冻存:标准的冻存程序流程为减温速度-1~-2℃/min;当溫度达-25℃下列时,可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可快速渗入液态氮中。也可将配有体细胞的冻存管放进-20℃电冰箱2h,随后放进-70℃电冰箱中留宿,取下冻存管,移进液氮容器内。

user-title

未来9

有帮助

通用细胞冻存液:以FBS、DMSO 为主要原材料配制

不同配方的区别主要体现在:价格、使用便捷性、保存条件等

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序