条件培养基的离心纯化问题

s2结束后，收集培养基上清液，并离心，过滤，即可得到条件培养基

一般是养细胞24h后，收集细胞上清。最好用0.45的滤器过滤，如果还是养同样的细胞，可以离心1000rpm10min，收上清

实验步骤 1. 条件细胞（条件细胞：同一种细胞、其他细胞系（如，3T 3 细胞），或小鼠胚胎成纤维细胞）生长至 50 % 汇合。

2. 更换培养基，继续培养 48 h 。

3. 收集培养基。

4. 离心，1000 g，10 min。

5. 0.45 μm 无菌过滤器（除菌滤器：0.45 μm 或0.22 μm ，过滤瓶）过滤（培养基可以先经过 5 μm 和 1.2 μm 过滤器预先过滤)。

6. 将条件培养基（克隆用培养基：Ham’s F12，加 10 % FBS 或适合待克隆细胞的培养基） -20°C 保存。

7. 用前解冻，按照如下比例加在克隆培养用培养基中：1 份条件培养基加 2 份克隆培养用培养基。