细胞污染时都会有哪些现象

经传代或换液不久后培养液变黄浑浊，细胞密度较低

长的速度变慢，细胞出枝叉，液体容易变黄，液体中有小点点，液体中有絮状物

细菌污染

特征：大小在0.5~5 μm，比动物细胞小很多。多呈球状或杆状，形态规则，分布均匀；增殖速度快，一般污染后48~72小时爆发式增殖；营养消耗快，培养基很快变黄，变浑浊；镜下观察有明显的定向运动。

处理方法：轻度污染可用10X双抗清洗处理，重度污染建议消杀后丢弃。

真菌污染

特征：呈链球状或丝状。常形成肉眼可见的菌落，培养基颜色无变化或变紫，仅对局部细胞影响较大，其他地方生长正常。会形成孢子，容易污染其他细胞。

处理方法：真菌污染较难根除，不建议保留，建议消杀后丢弃。

支原体污染

特征：最小的微生物，无法通过光学显微镜看见，但可通过电镜观察到。感染支原体的细胞，在某一时间点碎片突然增多，随着传代，细胞状态显著变差。支原体污染可通过气溶胶传播，影响同一细胞房其他细胞。

鉴定方法：PCR法、显色法、荧光染色法等。

处理方法：若细胞状态尚可，添加支原体抑制剂培养2-3代可转阴；若细胞状态很差，建议消杀后丢弃。

黑胶虫污染

特征：无明确定义，镜下无法直接观察到。主要表现为细胞状态差，黑点和碎片多，布朗运动。通过检测发现主要为支原体污染，部分为未知的增殖不明显的微生物污染。

处理方式：若细胞状态尚可，添加黑胶虫/支原体抑制剂培养2-3代可转阴；若细胞状态很差，建议消杀后丢弃。

细胞交叉污染

特征：即不同的细胞混杂在一起

鉴定方法：

同种属：STR鉴定，多等位基因数大于3个。

（需考虑本身的遗传背景，如EA.hy 926为融合细胞，本身就包含两套遗传信息）

不同种：PCR法，对种属特异性基因进行扩增，不同种属产物大小不同。

处理方法：建议重新引种。

真菌污染链球状或丝状。常形成肉眼可见的菌落，培养基颜色无变化或变紫，仅对局部细胞影响较大，其他地方生长正常。会形成孢子，容易污染其他细胞。