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花式三不沾
首先，在需要进去小鼠的脑部神经元培养时，你首先的先指导自己想要获得的是什么类型的神经元细胞，在脑部分区中那个部位大量存在你所需的神经元细胞，可以通过查阅文献或者是通过自己的额实验目的进行，或者你可能需要的是其他神经元，如背根神经元（DRG）这一类的。在前提1 的基础上必须进行实验方案的拟定，最终定制出适应的实验方案，再通过实验之后进行修正。这里需要提一下，不是所有的实验都会是一帆风顺的，多做多想多调。方案确定之后需要的进行实验耗材的准备，古语说的好，工欲善其器，必先利其器。如果不想让每一次的实验因为物品耗材的准备不足而失败，请做好准备。开始进行实验，便是解剖，多了解小鼠脑部解剖结构在个人的观点中，脑部原代培养的关键在消化以及如何分离出你想要的特定细胞，这是整个脑部原代培养的难点。消化方式的选择，最强暴的胰酶短时间消化，但是此法时间不好把握，容易导致细胞活力不佳及大量的死细胞，且会影响所分离出来的神经元状态。木瓜蛋白酶或许是一个不错选择，也可自主进行尝试，如木瓜蛋白酶+胶原酶的组合或许也有不一样的效果。特定神经元的分离可以选用密度梯度离心的方法进行尝试，也可以培养免疫吸附来达到自己的目的，这些方法不是一个标准的，需要先自己查阅资料之后进行尝试，免疫吸附的marker选择也尤其的重要，其会直接影响所分离的效果以及后续的细胞状态。最后的问题便是培养的问题。培养过程中状态的判定以及能够分离培养是否成功都是值得注意。以及培养方面的小细节具体如何都是可以尝试的。
bamboopiggy
找到一个大鼠的，不知道对你有没有参考。大鼠麻醉后迅速打开腹腔，取出小肠后立即放入预冷好台氏液的培养皿中，并漂洗干净。取距回盲部3 cm以上处的回肠，将其切割成2~3 cm的小块，并立刻置入冷的、持续通入95% O2和5% CO2混合气体的Krebs液中。用细小钢钉固定回肠两端，修剪多余的肠系膜及脂肪组织，体式显微镜下用眼科显微镊子分离黏膜层、黏膜下层，用蘸有Krebs液的棉花梳理纵行肌和环行肌，轻轻水平挪动分离纵行肌、环形肌，最后分离出纵行肌间神经丛。将新鲜剥离的纵行肌间神经丛放入冷Krebs液中漂洗3次。
天一湖医者
可以参考下这个文献https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=738210c5983acc2c5f8741f441763fcc
Eason老歌迷
首先，在需要进去小鼠的脑部神经元培养时，你首先的先指导自己想要获得的是什么类型的神经元细胞，在脑部分区中那个部位大量存在你所需的神经元细胞，可以通过查阅文献或者是通过自己的额实验目的进行，或者你可能需要的是其他神经元，如背根神经元（DRG）这一类的。在前提1 的基础上必须进行实验方案的拟定，最终定制出适应的实验方案，再通过实验之后进行修正。这里需要提一下，不是所有的实验都会是一帆风顺的，多做多想多调。方案确定之后需要的进行实验耗材的准备，古语说的好，工欲善其器，必先利其器。如果不想让每一次的实验因为物品耗材的准备不足而失败，请做好准备。开始进行实验，便是解剖，多了解小鼠脑部解剖结构在个人的观点中，脑部原代培养的关键在消化以及如何分离出你想要的特定细胞，这是整个脑部原代培养的难点。消化方式的选择，最强暴的胰酶短时间消化，但是此法时间不好把握，容易导致细胞活力不佳及大量的死细胞，且会影响所分离出来的神经元状态。木瓜蛋白酶或许是一个不错选择，也可自主进行尝试，如木瓜蛋白酶+胶原酶的组合或许也有不一样的效果。特定神经元的分离可以选用密度梯度离心的方法进行尝试，也可以培养免疫吸附来达到自己的目的，这些方法不是一个标准的，需要先自己查阅资料之后进行尝试，免疫吸附的marker选择也尤其的重要，其会直接影响所分离的效果以及后续的细胞状态。最后的问题便是培养的问题。培养过程中状态的判定以及能够分离培养是否成功都是值得注意。以及培养方面的小细节具体如何都是可以尝试的。
