请问细胞培养中长的慢不贴壁怎么办求助

1.半量换液 2.在皿底预先铺一层促贴壁试剂，试试

细胞长得慢没有可逆的办法，只能及时更换新的细胞。当然如果培养细胞是原代的话，生长速度是比较缓慢的，如果没有及时换液，营养成分不够，细胞也会生长缓慢。用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，以保证通气，要保持培养箱内空气干净等。

细胞不贴壁可能原因及解决办法： 1，胰酶消化过度；解决方法：适当缩短胰酶消化时间或降低胰酶浓度。 2，支原体污染；解决方法：分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。 3，培养瓶瓶底不干净；解决方法：换用新的培养皿或者培养瓶。 4，消化液或培养液配制错误、过期储存、储存不当；解决方法：重新配置消化液或培养液 5，细胞老化；解决方法：同样，没有可逆的办法，只能及时更换新的细胞。 6，接种细胞起始浓度太低或太高；解决方法：根据细胞特性接种适量的细胞。

1、可以在铺有琼脂和琼脂糖的培养皿上克隆细胞，也可在衬有琼脂的甲基纤维素的非组织培养用平皿制备细胞克隆。2、在这些支持物中应适当添加生长因子及添加物。3、如使用组织培养用平皿克隆细胞，应在灌制琼脂等支持物前铺加饲养层。

细胞不贴壁，有以下原因

1）细胞的传代最重要的是胰酶处理时间：消化不够细胞本身就是成团的；若胰酶处理太久，容易造成细胞膜蛋白损伤，使细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。

解决办法：缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。

2）缺少贴壁因子：血清中含有促贴壁因子，而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子，细胞的贴壁效果会下降很多。

解决办法：更换血清。

3）支原体或细菌的污染。

解决办法：分离培养物，检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染，丢弃培养物。

4）培养液配置、储存不当，如pH值过碱，Gln量太少等原因。

解决办法：使用无菌醋酸溶液调整pH值或充入无菌CO2。

5）复苏的细胞本身状态不好，已经老化，失去贴附性。

解决办法：启用新的保种细胞。

6）如果细胞比较珍贵或没有备份细胞

解决办法：可尝试将不贴壁细胞收集离心，再用PBS将沉淀清洗一遍，离心后的沉淀加入胰酶重新消化接种，同时提高血清浓度到15%-20%。