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丁香通

悬浮细胞培养状态很差,细胞成团,细胞上有很多毛毛点点的东西,有什么办法可以挽救吗

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dxy_gwrp7ndq

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4 个回答

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bamboopiggy

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血清不好,毛毛的东西是细胞碎片,换好血清,离心换液

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府宅

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1. 使用环丙沙星处理下,有的好用有的不好用,尝试使用;

2. 使用商业化的细胞污染物去除试剂。

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天一湖医者

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一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。

如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试以下方法:将细胞悬液收集到15 ml离心管中,静置20 min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。

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未来9

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细胞状态差,抱团了可以进行以下处理:

1,如果细胞抱团不影响生长就没问题,只是计数的时候要麻烦点了。在消化的时候在细胞由多角形变成圆型之前,就用手轻磕培养瓶的侧壁,使细胞从壁上脱落,就可以了!——最好不要吹打,对细胞性状和生长都不好。

2,如果感觉有死细胞的DNA,在细胞悬液中加入几滴无菌的DNAse(1mg/ml溶于水)将DNA链打断。轻柔地吹打细胞,防止对细胞膜造成物理损伤。

3,如果细胞抱团是肉眼可见的,那就让细胞静置半分钟左右,然后吸取上半部分没有抱团的细胞悬液来传代。如果细胞抱团肉眼不可见,那可能没有特别好的分离方法,只能等细胞状态改善后将这部分细胞慢慢排除出去。

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