府宅
bamboopiggy
可以更换好的血清,或半量换液,实在要扩,可以提高血清浓度到15-20%
天一湖医者
增加起始培养细胞浓度;
换入新鲜配制培养液;
补加生长因子;
血清需要保存在5℃到20℃,培养液需在2-8℃避光保存;
含血清培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;
要轻轻吹打消化细胞;
分离培养物,检测支原体;
比较新培养液与原培养液成分,让细胞逐渐适应新培养液。
未来9
造成细胞生长缓慢的主要原因及解决方法:
1,新配置的培养基以及换了新的血清,细胞不适应; 解决方法:最好使用最适宜的培养基,如果条件不允许,可以换液时不要全量换液逐渐增加新的培养基比例,1/4、1/2、3/4到1,多传代几次,让细胞慢慢适应。
2,细胞密度不够 有些细胞是细胞依赖性细胞,密度过低生长缓慢;也可能是细胞分泌促生长活性物质过少,细胞连接不好等原因。 解决办法:增加细胞接种密度;将细胞从大皿转移至小皿培养;适当增加培养基血清浓度。
3,培养环境改变 细胞培养箱的温度、CO2、细胞的生存环境要适宜,一般来说最佳温度:是37 ℃, CO2:浓度为5% , pH:为7.2-7.4,还有渗透压等,大家要注意调好,不要随意改变。
4,污染,如支原体,细菌,真菌等 解决办法:细胞污染是多方面的原因,一方面要严格无菌操作技术、保持清洁的环境,另一方面,污染之后要及时鉴别和处理,并且,建议大家使用品质良好的细胞株和培养基,这是是减少污染的最好方法。
5,细胞本身状态改变,如衰老等 解决办法:没有可逆的办法,只能及时更换新的细胞。 当然如果培养细胞是原代的话,生长速度是比较缓慢的,如果没有及时换液,营养成分不够,细胞也会生长缓慢。用螺旋口瓶培养细胞时,需将瓶盖微松,以保证通气,要保持培养箱内空气干净等。