小细胞肺癌悬浮细胞养不起来

是不是半贴壁，但是不用胰酶消化，用枪一吹就起来了？这样也可以，不一定非要纯悬浮。

缺少贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降很多。

细胞的传代最重要的是胰酶处理时间:消化不够细胞本身就是成团的;若胰酶处理太久,容易造成细胞膜蛋白损伤,使细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。

细胞生长缓慢的主要原因及解决方法：

1，新配置的培养基以及换了新的血清，细胞不适应; 解决方法：最好使用最适宜的培养基，如果条件不允许，可以换液时不要全量换液逐渐增加新的培养基比例，1/4、1/2、3/4到1，多传代几次，让细胞慢慢适应。

2，细胞密度不够 有些细胞是细胞依赖性细胞，密度过低生长缓慢;也可能是细胞分泌促生长活性物质过少，细胞连接不好等原因。 解决办法：增加细胞接种密度;将细胞从大皿转移至小皿培养;适当增加培养基血清浓度。

3，培养环境改变 细胞培养箱的温度、CO2、细胞的生存环境要适宜，一般来说最佳温度:是37 ℃， CO2:浓度为5% ， pH:为7.2-7.4，还有渗透压等，大家要注意调好，不要随意改变。

4，污染，如支原体，细菌，真菌等 解决办法：细胞污染是多方面的原因，一方面要严格无菌操作技术、保持清洁的环境，另一方面，污染之后要及时鉴别和处理，并且，建议大家使用品质良好的细胞株和培养基，这是是减少污染的最好方法。

5，细胞本身状态改变，如衰老等 解决办法：没有可逆的办法，只能及时更换新的细胞。