细胞传代培养液中黑点问题？

首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。

如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：

1.细胞生长过老，破碎的细胞残骸；

2.血清析出物，可能与保存化冻有关；

3.配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；

4.配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点；

5.培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

细胞培养中如何防止黑点生成

1. 尽可能地减少血清冻融次数。

2. 培养基保持最佳PH值7.0- 7.2。

3. 严格控制配制培养基的水质，容器按要求清洁后是否确认清洁有效及去污剂残留。

4. 掌握细胞传代的最佳时机，细胞切勿生长过老。