细胞传代方法
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贴壁生长细胞传代——采用酶消化法传代。常用的消化液是0.25%胰蛋白酶液。
1、将长成单层的细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液(以液面盖住细胞为宜)(我常加1ml),静置5~10分钟。
2、在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。
3、将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。
4、传代细胞培养结果
一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。